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細胞培養(yǎng)實驗原理介紹技術服務外包介紹
更新時間:2023-09-27   點擊次數(shù):837次

細胞培養(yǎng)

從體內組織取出細胞,在體外培養(yǎng)使其生長繁殖并維持其結構和功能的一種培養(yǎng)技術。

細胞培養(yǎng)的意義

1. 是細胞生物學研究中基礎、基本的一項技術,可以用來進行藥物篩選、疫苗生產、抗體制備等。

2. 可以模擬復雜的生命活動機制 in vitro(體外)-in vivo(體內)。主要是大部分實驗無法把活體作為實驗對象,因此需要先在細胞水平進行研究,再從體內進行驗證。

3. 可以通過細胞培養(yǎng)獲得大量實驗細胞,進而研究實驗細胞的信號轉導、物質及能量代謝以及細胞的增殖凋亡等。

常見細胞培養(yǎng)類型

1. 原代細胞培養(yǎng):

從生物體組織、器官中分離得到的原代細胞,通過機械方法、酶、螯合劑(如EDTA)來處理分散成單細胞,置于培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),注意原代培養(yǎng)的貼壁依賴性細胞需要使用促進貼壁的包被培養(yǎng)皿(如使用多聚賴氨酸),從而幫助細胞貼壁,促進細胞的生長和增殖。。

2. 貼壁細胞培養(yǎng):

貼壁培養(yǎng)主要適用于貼壁依賴性的細胞,細胞貼附于培養(yǎng)皿的表面生長,當生長鋪滿平面時會發(fā)生接觸抑制,此時就需要對細胞進行傳代處理。傳代方式也是采用酶消化法,可根據(jù)具體需要,選擇是否使用多聚賴氨酸鋪皿來促進細胞貼壁生長。

3. 懸浮細胞培養(yǎng):

懸浮培養(yǎng)主要適用于非貼壁依賴性的細胞,細胞或者細胞的聚集體懸浮于培養(yǎng)液中,懸浮培養(yǎng)是一種大規(guī)模細胞培養(yǎng)的理想方式。懸浮培養(yǎng)需要保持良好的分散狀態(tài),因此需要再振蕩的條件下培養(yǎng),形成分散良好的懸浮培養(yǎng)物。當細胞培養(yǎng)至一定密度時需進行傳代,傳代時需去除較大的細胞聚集體和殘渣物。

4. 干細胞的培養(yǎng):

干細胞具有自我更新和自我維持的能力,可以無限次地進行增殖分裂,是一類尚未充分分化多潛能的細胞,在一定條件下,可以分化成多種功能細胞。根據(jù)干細胞的類型選擇貼壁培養(yǎng)或懸浮培養(yǎng)的方式,通常干細胞生長于鋪有輔助附著的細胞外基質的成分(如明膠、基質膠或膠原蛋白等)或是MEF飼養(yǎng)層的培養(yǎng)皿上,除了這類傳統(tǒng)的二維培養(yǎng)技術,還可以使用三維的培養(yǎng)技術來模擬生物機體內環(huán)境,可根據(jù)不同的細胞類型來進行培養(yǎng)條件的優(yōu)化和分析。

結果展示

人肺動脈內皮原代細胞 人尿液原代細胞

實驗完成周期及交付標準

1. 實驗周期:一般細胞培養(yǎng)時間為2-5天,特殊細胞培養(yǎng)根據(jù)細胞說明書而定。

2. 交付標準:細胞圖片、實驗報告(試劑、耗材、實驗步驟)

需確認的信息

1. 需要培養(yǎng)細胞的具體名稱?

2. 客戶是否提供細胞還是我方代購?

3. 細胞培養(yǎng)只是為本實驗獲得標本,我們需要具體對細胞進行哪些具體生物學功能檢測?如增殖、凋亡、遷移、侵襲等


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