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蛋白免疫共沉淀Co-IP技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)

蛋白免疫共沉淀Co-IP技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)

型號(hào):   更新時(shí)間:2024-11-09

簡(jiǎn)要描述:

蛋白免疫共沉淀Co-IP技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn) 是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究?jī)煞N蛋白質(zhì)相互作用的有效方法

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應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁

蛋白免疫共沉淀Co-IP技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)簡(jiǎn)介

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究?jī)煞N蛋白質(zhì)相互作用的有效方法。這種方法常用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合,也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔,已成為研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。

當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí),完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來(lái)。當(dāng)用預(yù)先固化在argarose beads上的蛋白質(zhì)A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來(lái)。再通過(guò)蛋白變性分離,對(duì)B蛋白進(jìn)行檢測(cè),進(jìn)而證明兩者間的相互作用。

這種方法得到的目的蛋白是在細(xì)胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的,符合體內(nèi)實(shí)際情況,得到的結(jié)果可信度高。這種方法常用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合;也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。

 

蛋白免疫共沉淀Co-IP技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)價(jià)格與周期

服務(wù)項(xiàng)目

內(nèi)容

價(jià)格

服務(wù)周期

免疫共沉淀

我們進(jìn)行CO-IP和Western Blot檢測(cè)

詢價(jià)

3-4周

 

免疫共沉淀服務(wù)步驟

(1)轉(zhuǎn)染后24-48 h 可收獲細(xì)胞,加入適量細(xì)胞裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑),冰上裂解30min, 細(xì)胞裂解液于4°C, 大轉(zhuǎn)速離心30 min后取上清;

(2)取少量裂解液以備Western blot分析,剩余裂解液加1μg相應(yīng)的抗體加入到細(xì)胞裂解液,4°C緩慢搖晃孵育過(guò)夜;

(3)取10μl protein A 瓊脂糖珠,用適量裂解緩沖液洗3 次,每次3,000 rpm離心3 min;

(4)將預(yù)處理過(guò)的10μl protein A 瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過(guò)夜的細(xì)胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h,使抗體與protein A瓊脂糖珠耦聯(lián);

(5)免疫沉淀反應(yīng)后,在4°C 以3,000 rpm 速度離心3 min,將瓊脂糖珠離心至管底;將上清小心吸去,瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3-4次;后加入15μl的2×SDS 上樣緩沖液,沸水煮5分鐘;

(6)SDS-PAGE, Western blotting或質(zhì)譜儀分析。

客戶提供

客戶提供蛋白樣品和沉淀用抗體;

新鮮的樣本材料(組織、細(xì)胞或蛋白溶液);

用于western blot的一抗。

生物服務(wù)承諾
免疫共沉淀電子圖片及分析結(jié)果;
相互作用蛋白鑒定結(jié)果,質(zhì)譜鑒定結(jié)果和(或)western blot鑒定結(jié)果。


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