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細胞克隆形成實驗技術服務

細胞克隆形成實驗技術服務

型號:   更新時間:2024-11-09

簡要描述:

細胞克隆形成實驗技術服務 細胞克隆形成率即細胞接種存活率,表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數(shù)量

品牌上海創(chuàng)凌供貨周期現(xiàn)貨
應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁

細胞克隆形成實驗技術服務介紹

細胞克隆形成率即細胞接種存活率,表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數(shù)量。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞??寺⌒纬陕史从臣毎后w依賴性和增殖能力兩個重要性狀。

 

 

細胞克隆形成實驗技術服務基本步驟

A、取對數(shù)生長期的各組細胞,分別用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成單個細胞,并把細胞懸浮在10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中備用。

B、將細胞懸液作梯度倍數(shù)稀釋,每組細胞分別以每皿50、100、200個細胞的梯度密度分別接種含10mL 37℃預溫培養(yǎng)液的皿中,并輕輕轉動,使細胞分散均勻。置37℃ 5% CO2及飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3周。

C、經(jīng)常觀察,當培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見的克隆時,終止培養(yǎng)。棄去上清液,用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定細胞5mL固定15分鐘。然后去固定液,加適量GIMSA應用染色液染10~30分鐘,然后用流水緩慢洗去染色液,空氣干燥。

D、將平皿倒置并疊加一張帶網(wǎng)格的透明膠片,用肉眼直接計數(shù)克隆,或在顯微鏡(低倍鏡)計數(shù)大于10個細胞的克隆數(shù)。后計算克隆形成率??寺⌒纬陕?=(克隆數(shù)/接種細胞數(shù))×100%

平板克隆形成試驗方法簡單,適用于貼壁生長的細胞。適宜底物為玻璃的、塑料瓶皿。試驗成功的關鍵是細胞懸液的制備和接種密度。細胞一定要分散得好,不能有細胞團,接種密度不能過大。

實驗結果展示

 

客戶需知

1)、客戶需提供生長狀態(tài)良好的實驗細胞及細胞培養(yǎng)條件; 

2)、客戶需準確告知實驗設計內(nèi)容,如樣本濃度等,并提供實驗所需因子等。

實驗周期

15個工作日(具體實驗周期視實驗設計方案而異)

收費標準 

歡迎咨詢創(chuàng)凌生物!


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