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淺談內(nèi)毒素對細(xì)胞培養(yǎng)的影響

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內(nèi)毒素對細(xì)胞培養(yǎng)的影響

在細(xì)胞培養(yǎng)的精密世界中，一個微小的污染都可能dian覆整個實驗的進(jìn)程。今天，我們要聚焦的正是這個不容忽視的隱形威脅——內(nèi)毒素。

BioProE是我公司自產(chǎn)的DPBS，低內(nèi)毒素，對細(xì)胞的傷害降到zui低！

內(nèi)毒素：細(xì)胞培養(yǎng)的“隱形刺客"

內(nèi)毒素，這個聽起來有些陌生的名詞，實際上在細(xì)胞培養(yǎng)中扮演著不容忽視的角色。它是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的一種成分，當(dāng)細(xì)菌死亡或細(xì)胞壁破裂后，內(nèi)毒素就會被釋放出來。這些微小的分子，雖然肉眼不可見，但卻能對細(xì)胞產(chǎn)生巨大的影響。

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，內(nèi)毒素的污染可能導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢、細(xì)胞毒性增加，甚至影響瞬時轉(zhuǎn)染的效率。想象一下，您精心設(shè)計的實驗，因為內(nèi)毒素的污染而功虧一簣，是不是非常令人沮喪？對于追求精準(zhǔn)與高效的現(xiàn)代生物研究而言，內(nèi)毒素控制成為了不可回避的挑戰(zhàn)。

圖1 內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)

內(nèi)毒素對細(xì)胞培養(yǎng)的影響

1. 免疫和炎癥反應(yīng)： 內(nèi)毒素可以激活細(xì)胞的免疫反應(yīng)，導(dǎo)致炎癥因子的釋放，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）等。這些炎癥因子可以影響細(xì)胞的生理功能，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)信號通路的紊亂，甚至可能引發(fā)細(xì)胞凋亡。

2. 細(xì)胞生長和代謝的影響： 高水平的內(nèi)毒素暴露可能影響細(xì)胞的生長和代謝。細(xì)胞在免疫激活狀態(tài)下可能會減緩生長，因為它們需要將資源用于炎癥反應(yīng)。此外，內(nèi)毒素可能干擾細(xì)胞的代謝途徑，影響蛋白質(zhì)合成、DNA合成等。

3. 實驗結(jié)果的“ding時zhadan"：內(nèi)毒素的存在使實驗結(jié)果變得不穩(wěn)定，可靠性大打折扣。

4. 影響細(xì)胞因子和蛋白質(zhì)的表達(dá)：內(nèi)毒素的存在可能導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生炎癥相關(guān)的細(xì)胞因子和蛋白質(zhì)的表達(dá)增加。這可能對特定的研究課題產(chǎn)生影響，如細(xì)胞信號通路、蛋白質(zhì)相互作用等的研究。

內(nèi)毒素對瞬時轉(zhuǎn)染的影響

內(nèi)毒素的存在會極大程度地影響轉(zhuǎn)染效率。由于內(nèi)毒素的兩親性和負(fù)電荷性，性質(zhì)類似于DNA，因此在質(zhì)粒純化中會伴隨質(zhì)粒一同被純化出來。這些內(nèi)毒素在轉(zhuǎn)染過程中可能與轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒形成不穩(wěn)定的復(fù)合物，從而降低質(zhì)粒與細(xì)胞的結(jié)合效率和轉(zhuǎn)染效率。

具體來說，高純度的質(zhì)粒、低類毒素細(xì)胞生長環(huán)境是獲得高轉(zhuǎn)染效率的必要條件，內(nèi)毒素含量越低，轉(zhuǎn)染效率也相應(yīng)提高。特別是在使用陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑時，內(nèi)毒素的影響更為顯著，所以確保細(xì)胞培養(yǎng)液中低類毒素含量是非常重要的。

1. 轉(zhuǎn)染效率降低：干擾轉(zhuǎn)染復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞或影響其在細(xì)胞內(nèi)的作用，導(dǎo)致成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞比例下降。

2. 基因表達(dá)異常：使轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平不穩(wěn)定或降低，影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。 
3. 細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)：引發(fā)細(xì)胞一系列應(yīng)激相關(guān)的信號通路變化，進(jìn)而間接影響轉(zhuǎn)染過程和后續(xù)的基因表達(dá)。

如何降低細(xì)胞培養(yǎng)中的內(nèi)毒素含量？

1.所有實驗室器皿、培養(yǎng)基原料、以及適當(dāng)?shù)膶嶒炇壹夹g(shù)的che底清潔，對于大幅降低細(xì)胞培養(yǎng)實驗室中的內(nèi)毒素水平至關(guān)重要。

2.使用來自可靠試劑供應(yīng)商提供的經(jīng)內(nèi)毒素測試的試劑、補(bǔ)劑和培養(yǎng)基

總之，內(nèi)毒素對細(xì)胞培養(yǎng)有負(fù)面影響，需要合理選擇試劑，并嚴(yán)格控制培養(yǎng)條件，以降低內(nèi)毒素對細(xì)胞的不良影響。選擇合適的產(chǎn)品，可以讓你的細(xì)胞培養(yǎng)實驗更省心，尤其是難養(yǎng)的免疫細(xì)胞，干細(xì)胞等，更需要使用超低內(nèi)毒素PBS、RPMI1640、DMEM、DMEM/F12等進(jìn)行培養(yǎng)。