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ReadyPCRTM快速16S rDNA細菌鑒定試劑盒介紹及參數(shù)分析
更新時間:2023-03-16   點擊次數(shù):796次

Nu-16S01


試劑盒應(yīng)用

本試劑盒主要用于細菌16S rDNA 的快速檢測,無需經(jīng)過繁瑣的基因組DNA 提取純化,取樣后直接

PCR 擴增即可獲得16S rDNA 信息,通過比對16S 片段序列,最終獲得細菌種屬信息。

本試劑盒可以檢測量低至104 個/mL 個細菌,對難培養(yǎng)、珍貴樣本、表型不能鑒定的未知細菌快速擴

增尤為方便。使用本試劑盒前無需提取純化,可直接對菌斑、甘油菌或?qū)?shù)生長期菌進行檢測,從

而大大縮短了檢測時間。試劑盒中提供的16S PCR Premix 已包含有染料,PCR 結(jié)束后直接進行瓊脂

糖凝膠電泳,PCR 產(chǎn)物可直接進行測序分析。

本產(chǎn)品僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

保存條件

-20oC 保存。使用時請置于冰上。

使用方法

1、樣本準備:

1)菌液:取對數(shù)生長期菌液1-3 μL 加入PCR 反應(yīng)體系中。

2)甘油菌:取1μL 菌液加入PCR 反應(yīng)體系中。

3)單菌落:無菌吸頭或者無菌牙簽挑取單個菌落置于500 μL 無菌生理鹽水中,渦旋混合均勻,取

1-3 μL 加入PCR 反應(yīng)體系中。

2、推薦PCR 反應(yīng)體系

3、按照以下方法設(shè)定PCR 反應(yīng)

4、瓊脂糖凝膠電泳

使用1%瓊脂糖凝膠進行電泳,不同菌株電泳片段稍微差別,一般為1.5kb 左右。

5、PCR 產(chǎn)物回收和測序

使用切膠回收試劑盒進行回收,并使用以下推薦引物進行測序。將DNA 測序結(jié)果與NCBI 數(shù)據(jù)

庫進行比對,確定細菌種類。

注意事項

1、超凈臺中操作,應(yīng)佩戴無菌手套,穿實驗服,操作前用75%乙醇對實驗器具進行消毒。

2、使用無菌移液吸頭和離心管,開蓋務(wù)必輕柔,減少氣溶膠污染。

3、盡可能使用2 次純化細菌,以提高測序有效率。



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