產(chǎn)品貨號(hào)：M-DNA01

產(chǎn)品名稱(chēng)：廣譜型DNA免核酸提取試劑

產(chǎn)品規(guī)格：1ml 50T

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒中采用配方，能夠快速高效的裂解各種常見(jiàn)樣本，無(wú)需反復(fù)離心，通過(guò)裂解方式獲得高質(zhì)量的DNA。該DNA無(wú)需進(jìn)行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCR、Lamp等擴(kuò)增。

DNA-Lysis可用于全血、血清、唾液、腹水、細(xì)胞、組織（例如淋巴結(jié)、脾臟、腎臟、扁桃體、肺、肌肉等）、拭子（例如血拭子、咽拭子）、鼠尾、病毒、革蘭氏陽(yáng)性菌、大腸桿菌、葡萄球菌以及環(huán)境樣本（例如擦拭物、水樣本、鞋底）等樣品中基因組DNA的提取。

本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

試劑盒組成

組分

M-DNA01

DNA-Lysis

1 mL

保存條件

4oC保存。使用前將DNA-Lysis室溫充分混勻（若出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)小球狀物質(zhì)屬正?，F(xiàn)象）。

需要準(zhǔn)備

金屬恒溫浴、離心機(jī)

使用方法

一、不同樣品的處理方法

1. 組織液的處理

（1）組織液包括組織研磨液、傳代細(xì)胞懸液、血清、唾液、尿液等。取20 μL組織液置于離心管中。

（2）取10 μL（1）中組織液，加入20 μL DNA-Lysis。

（3）混勻。

（4）置于55oC加熱5分鐘。

（5）12000rpm離心2-3分鐘，取上清。

注意：組織液為血液樣品時(shí)，提取獲得的DNA用于熒光定量PCR時(shí)，需要將提取物按照1：40稀釋。例如5μL 提取物加入195μL中。

2. 組織塊的處理

（1）取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。

（2）用眼科剪取半顆米粒大小的組織塊（< 3 mm3），并將組織塊剪成肉泥狀，放在（1）中溶液中。

（3）混勻。

（4）置于55oC加熱5分鐘。

（5）12000rpm離心2-3分鐘，取上清。

3. 菌類(lèi)的處理

（1）取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。

（2）用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分，放在（1）中溶液中。如果是培養(yǎng)液，取20μL放在（1）中溶液中。

（3）混勻。

（4）置于55oC加熱5分鐘。

（5）12000rpm離心2-3分鐘，取上清。

二、在DNase free 的離心管中配制PCR反應(yīng)體系

注意事項(xiàng)

（1）在進(jìn)行大量樣品檢測(cè)時(shí)，可將本試劑盒的試劑預(yù)分裝到8聯(lián)PCR管，用多通道移液器進(jìn)行多樣本的處理。

（2）取樣的細(xì)胞量應(yīng)當(dāng)適中，濃度不宜過(guò)高或過(guò)低，處理后溶液應(yīng)當(dāng)以透明為宜。擴(kuò)增細(xì)胞DNA時(shí)，取2000個(gè)細(xì)胞以?xún)?nèi)即可；擴(kuò)增病毒基因時(shí)需要根據(jù)病毒的滴度決定取樣的細(xì)胞數(shù)量。

（3）樣品處理過(guò)程中應(yīng)當(dāng)防止交叉污染，推薦設(shè)置陰性樣品參與處理過(guò)程，以檢測(cè)環(huán)境的污染。

（4）PCR的退火溫度可根據(jù)引物的預(yù)測(cè)Tm值減去5℃，或者通過(guò)梯度PCR摸索*佳退火溫度。

（5）用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存1個(gè)月。

（6）為防止試劑盒污染，請(qǐng)勿將不同批號(hào)試劑盒混用。