簡(jiǎn)要描述：

RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑是一種新開發(fā)的試劑，用于將 DNA 和 siRNA 轉(zhuǎn)染到真核細(xì)胞系和各種原代細(xì)胞中。

RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑

簡(jiǎn)要描述：

RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑是一種新開發(fā)的試劑，用于將 DNA 和 siRNA 轉(zhuǎn)染到真核細(xì)胞系和各種原代細(xì)胞中。

產(chǎn)品介紹

RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑介紹：

進(jìn)入細(xì)胞后可以被代謝的新型小分子多肽轉(zhuǎn)染試劑，對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性，不易出現(xiàn)細(xì)胞死亡，不激活細(xì)胞免疫機(jī)制。其特點(diǎn)是非脂質(zhì)體材料，大小是80nm左右，由于形狀是圓形的，不會(huì)對(duì)細(xì)胞有物理性損傷，材料表面有特異性結(jié)合接頭，只特異性識(shí)別DNA、RNA，對(duì)血清成分（如細(xì)胞因子、蛋白、內(nèi)毒素等）不識(shí)別也不結(jié)合；特異性接頭與核酸形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物，轉(zhuǎn)染復(fù)合物通過(guò)細(xì)胞主動(dòng)吞噬進(jìn)入細(xì)胞，進(jìn)入細(xì)胞后可以被代謝的新型小分子多肽材料，對(duì)細(xì)胞無(wú)內(nèi)毒素影響，不易出現(xiàn)細(xì)胞死亡。

一、產(chǎn)品說(shuō)明：

1、產(chǎn)品名稱

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規(guī)格

貨號(hào)：AD600150

規(guī)格：1.5ml

3、儲(chǔ)存條件

常溫運(yùn)輸，4℃保存，可保存兩年，拒絕反復(fù)凍融。

二、操作步驟

提 1 天接種細(xì)胞：細(xì)胞匯合度在 60-80%左右，再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

核酸復(fù)合物制備：將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混勻，室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物：根據(jù)參考用量在細(xì)胞中加入核酸復(fù)合物，并輕輕混勻；細(xì)胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。

細(xì)胞換液：轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行正常換液，懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程中不用換液。

分析結(jié)果：質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染 48-72 小時(shí)后熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率，48-96 小時(shí)檢測(cè) mRNA 或蛋白表達(dá)。若 進(jìn)行穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株的篩選，則在轉(zhuǎn)染后 24-48 小時(shí)左右加入適量的藥物進(jìn)行篩選。siRNA 轉(zhuǎn)染后 9 小時(shí)熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率，48-72 小時(shí)檢測(cè) mRNA 或蛋白表達(dá)。

三、RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效果圖和轉(zhuǎn)染條件分享

轉(zhuǎn)染細(xì)胞：RAW264.7細(xì)胞；

培養(yǎng)板：12孔板；

轉(zhuǎn)染時(shí)間：48小時(shí)；

轉(zhuǎn)染細(xì)胞起始數(shù)量： 電訊；

轉(zhuǎn)染試劑用量：電訊；

轉(zhuǎn)染試劑：Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑；

培養(yǎng)細(xì)胞使用血清：Zeta Life,Z7180FBS-500超低內(nèi)毒胎牛血清